上海什么是供卵_上海供卵试管中心排行_孕产_老公弱精致多年不孕，钱美女夫妇

　　钱美女（化名）和张先生（化名）结婚几年一直未孕，备孕几年后，经过检查发现是男方弱精导致不孕不育，尝试了监测排卵自然同房及人授等方式依旧不孕，夫妻俩决定做试管手术　　夫妻到公司来详细了解后回去考虑了贰天就决定去泰国做试管婴儿，而且想选择生个男宝宝。　　张先生的泰国试管之旅很顺利，打针、胚胎筛查、胚胎移植都是一次完成。所有的事情都非常的顺利，没有跌宕起伏起伏的过程，不过没有波澜对做试管的人来说恰恰就是最幸福的事，爱嘉国际多给大家分享一个值得庆祝的喜讯，让所有想做试管婴儿的人都能够分享幸福。下面是具体的过程：　　钱美女泰国试管进程：　　玖月贰贰日见医生，测得卵泡右边伍个，左边叁个，经过方案评估和制定，最终决定先打三天针GF肆零零unit 。　　贰伍号见医生，测得E贰:贰捌.叁、FSH：玖、LH：肆.玖、AMH：贰.捌伍;内膜柒mm，卵泡右边伍个，左边伍个，继续打伍天针GF肆零零unit孕产。　　叁零号再次见医生，测得 E贰:伍壹贰.捌、LH：壹.柒;内膜壹壹mm(有白色阴影)，卵泡右边伍个，左边伍个(两边大小均匀) ，再打一天针(同剂量)。　　壹零月壹号见医生，测得 E贰:叁零贰捌、LH：壹.陆、P肆:贰.捌伍(偏高);内膜壹贰mm，卵泡右边伍个，左边陆个，再打一天针(同剂量)，明晚贰壹:叁零夜针，　　约定壹零月肆号取卵。

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　　胚胎培育：　　第一天：壹零月 肆日取卵壹零个 ，成熟捌个，成功受精捌个 ，确定做伍天贰叁对筛查。　　第三天：肆个胚胎发育在捌细胞；贰个胚胎发育在柒细胞；贰个胚胎发育在贰细胞；　　第五天：达到筛查肆个(等结果)。　　第六天：达到筛查壹个(等结果)；最终冷冻：壹男叁女正常胚胎。　　?　　移植阶段：　　壹贰月贰柒日见医生，子宫内膜柒.柒mm，今晚开始塞药，　　壹月壹日见医生，内膜捌.柒mm,陆号抽血，　　壹月陆号抽血，　　壹月柒号壹叁：贰零移植一个男胚，E贰-壹伍壹.肆、P肆-零.贰壹;　　柒号移植　　壹月壹捌日验孕。　　回国后叁天，爱嘉国际联系钱美女复查，一切正常！（上面的日期是贰零壹捌年的时间，目前客户正在怀孕中，未生产。试管）　　备孕第一个月没中第三代试管婴儿，看着大姨妈如期而来，心里很难过，但是第二个月竟然中啦，当时测到双杠，我和老公激动高兴的心情真的宫腔粘连无法用言语表达，我至少到了晚上按时睡觉了卵巢早衰，老公兴奋的一整晚都没去睡。

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结果……　　一直到9周，查不出胎心胎芽，大夫建议尽快做清宫手术，否则对大人的影响会很大，含着泪做了手术。

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最后也没去做全面检查。　　到了2020年6月份距离我上次清宫手术已经半年了，想着可以备孕了吧，刚好知道社区可以做免费的孕前检查，所以就和老公去检查了，结果b超提示我可能宫腔粘连，但是说不能确诊，要确诊的南方39助孕网卵巢早衰话，得做宫腔镜检查。

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说可以试着怀卵巢早衰，假如能顺利怀上，那粘连不会有影响，为了再次确定到底能不能怀，我又咨询了别的医院的大夫，大夫也说可以怀，所以就试孕，真没想到，我比较易孕，当月就怀了。#卵巢早衰供卵群#　　传送门 ：【卵巢早衰供卵群】胎停、宫外孕、宫腔粘连的我终于好孕啦，还愿（下） 脂肪干细胞的郑大二附属有供卵的吗提取及鉴定 　　3.3.2 观察 细胞传代后，每天对细胞进行观察，注意污染与否、细胞贴壁和生长状态等 情况 消化传代。 此过程中所做处理同原代培养。 注意观察细胞五个时期的特点 （游 离期、吸附期、繁殖期、维持期、衰退期）。 细胞已基本铺满瓶壁形成致密单层，这时可进行再次传代培养。 4 细胞镜下作形态学观察及取第三代细胞用流式细胞仪作细胞周期及细胞 免疫表型（CD29/CD44）的鉴定 4.1 在细胞镜下作形态学观察， 与正常形态比较 （原代培养后， 传代 2-3 次， ACSs 呈现单层，大而扁的细胞形态，其直径在 25-30um，待细胞达到汇合时，它 们形态上呈纺锤形，类似于成纤维细胞） 4.2 细胞周期分析 分别取生长融合达 30%-40%和 90%以上的第三代细胞，以 4°C 预冷的 70%冰 乙醇固定，4°C 放置 24 小时；用 PBS 洗涤 2 次；加入 RNA 酶 10ug 和碘化丙啶 （PI）0.3ml 重悬细胞（4°C，30 分钟）。用流式细胞仪以 FL2 红色荧光条件检 测。应用 Modfit LT 2.0 软件分析细胞周期。 取第三代细胞用流式细胞仪作细胞周期及细胞免疫表型（CD29/CD44）的鉴 定。 4.2 细胞表面分子免疫标记的鉴定 a.方法：直接免疫荧光法 b．试剂及材料：单克隆抗体 CD29 PE，CD44 PE,及同型对照抗体；细胞洗 液：含 2%BSA、0.1%NaN3 的 PBS；固定液：1%多聚甲醛 PBS 液（pH7.2）；4、流 式细胞仪。 c．操作方法： 6 每个样品取 2 只，分别标记同型抗体作为阴性对照、待测，分别加入 10 个 /100ul 待测细胞。对同型对照管中加入荧光标记单克隆抗体 CD29 、CD44 对照 抗体作为阴性对照，待测管加入荧光标记单克隆抗体 CD29 PE，CD44 PE 为实验 管，各 20ul，混匀。置于于室温避光孵育 30 分钟，加入 2ml 的 PBS，郑大二附属有供卵的吗1200r/min 离心 10min，弃上清，郑大二附属有供卵的吗控干，加入固定液 0.5ml（染色缓冲剂）。先测同型对照， 再测实验管。软件采集数据，分析阳性细胞比例。 二、携带 PTN 表达基因的脂肪干细胞的获取及鉴定 1、实验技术及原理：运用基因转染技术，将带 PTN 基因的反转录病毒载体 转染到脂肪干细胞，抗生素 G418 和流式细胞仪筛选，得到 PTN 高表达的脂肪干 细胞。 2、具体操作： 2.1 材料及试剂： 2.2 脂肪干细胞的准备：被用于作靶基因转染的细胞，其生长状态如何，将 直接决定了基因转染效率。如为贴壁生长的细胞，一般要求在转染前一日，必需 应用胰酶处理成单细胞悬液， 重新接种于培养皿或瓶，细胞密度以铺满培养器皿 的 60%为宜，转染当日，在转染前 4 小时换一将近新鲜培养液。对于悬浮细胞， 也需在转染前 4 小时换一次新鲜培养液。 2.3 将带 PTN 基因的反转录病毒载体转染到脂肪干细胞，带有 PTN 基因混合 物应当逐滴加入，尽可能保持一致，从培养皿一边到另一边，边加入边轻摇培养 皿，以确保均匀分布和避免局部高浓度。 2.4 用抗生素 G418 和流式细胞仪筛选，得到 PTN 高表达的脂肪干细胞 G418 筛选要做预试验确定最佳浓度， 将细胞稀释至 1000cell/ml， 每孔 100ul 加入有培养基的 24 孔板， 将每孔中的 G418 浓度稀释至 0,100, 200,300, 400,500, 600,700, 800,900, 1000,1100ng/ml 等１2 个级别, 培养 10-14 天，以最低细胞 全部死亡浓度为基准，一般 400-800 左右，筛选时比该浓度再高一个级别，维持 使用筛选浓度的一半 流式细胞仪分析：SHG-44、SHG-44-vect、SHG-44-重组 pcDNA3→单细胞悬 液→70%酒精固定→裂解细胞→核糖核酸酶消化→碘化丙啶染色→上机分析 G1 期 和 G2/M、S 期比例。